常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等),實(shí)驗(yàn)儀器是否需要預(yù)約使用。如果需要外送生物公司檢測,需要提前聯(lián)系好商家,以及了解清楚樣本如何獲取,如何運(yùn)輸。飼養(yǎng)動(dòng)物及干預(yù)動(dòng)物購買后需要將時(shí)間節(jié)點(diǎn)提前規(guī)劃好,比如,周需要做什么?測量體重?觀察飲食?測量需要的指標(biāo)?中間有無特殊操作?比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血?……第幾周取材?取材需要哪些組織?預(yù)實(shí)驗(yàn)方案就要提前設(shè)計(jì)清楚以上內(nèi)容。取材及樣品準(zhǔn)備取材需要提前到動(dòng)物房禁食、稱體重、取出動(dòng)物、手術(shù)器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管,WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管,是否需要冰塊?是否需要液氮?取材當(dāng)天需要多少人?是否需要請人幫忙?如果所需要取出的樣本較多,建議大家請人一起幫忙,流水線作業(yè),這樣能節(jié)省時(shí)間,并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請人,每個(gè)人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作,比如誰負(fù)責(zé)麻醉,誰負(fù)責(zé)取血液,誰負(fù)責(zé)取,誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)儲存,都需要提前規(guī)劃交代清楚。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測如果是需要自己做的檢測,比如常見的WesternBlot、PCR,建議提前可以看看教程(無論是視頻還是貼吧,都要自己多方參考)。有了一定的理論基礎(chǔ)后。膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型。北京豚鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室
經(jīng)多級乙醇至水洗:二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min;4)蘇木素染色5分鐘,自來水沖洗;5)鹽酸乙醇分化30秒;6)自來水浸泡15分鐘;7)置伊紅液2分鐘。8)常規(guī)脫水,透明,封片:95%乙醇(i)1min→95%乙醇(ⅱ)1min→100%乙醇(i)1min→100%乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個(gè)月時(shí),與ctrl(對照)小鼠比較,sixko小鼠的視網(wǎng)膜外核層已經(jīng)開始變薄,表明感光細(xì)胞死亡(圖7)。實(shí)施例5視網(wǎng)膜冰凍切片免疫染色:取4月齡的由實(shí)施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后,快速取眼球,并放入4%的pfa中,冰上固定15min后,在角膜上剪口,然后繼續(xù)冰上固定。2h后,pbs緩沖液沖洗3遍,然后將眼球置于30%蔗糖溶液中脫水2h,然后解剖鏡下剪去角膜及晶體,oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后,取出oct包埋的眼球,置于冰凍切片機(jī)-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后,選取質(zhì)量較高的片子于37℃烘箱放置30min,然后免疫組化筆在有視網(wǎng)膜組織的地方畫圈,pbs洗三遍以去除oct。西藏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是臨床上具有代表性的一種慢性纖維化性肺。
建立疾病模型的目的是為了防治人類疾病。因此,疾病模型研究結(jié)果的可靠程度取決于模型與人類疾病的相似或可比擬的程度。接下來就讓上海研錄帶您了解相關(guān)知識。一個(gè)好的疾病模型應(yīng)具有以下特點(diǎn):①能夠再現(xiàn)所要研究的人類疾病,動(dòng)物疾病表現(xiàn)應(yīng)該與人類疾病相似;②動(dòng)物能重復(fù)產(chǎn)生該疾病,盡可能能在兩種動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制該?。虎蹌?dòng)物背景資料完整,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格,生命周期要滿足實(shí)驗(yàn)需要;④動(dòng)物要價(jià)廉、來源充足、便于運(yùn)送;⑤盡可能選用小動(dòng)物。生物醫(yī)學(xué)科研專業(yè)設(shè)計(jì)中常要考慮如何建立動(dòng)物模型的問題,因?yàn)楹芏嚓U明疾病及療效機(jī)制的實(shí)驗(yàn)不可能或不應(yīng)該在患者身上進(jìn)行。常要依賴于復(fù)制動(dòng)物模型,但一定要進(jìn)行周密設(shè)計(jì),設(shè)計(jì)時(shí)要遵循下列一些原則:(一)相似性在動(dòng)物身上復(fù)制人類疾病模型,目的在于從中找出可以推演應(yīng)用于患者的有關(guān)規(guī)律。外推法(extrapolation)要冒風(fēng)險(xiǎn),因?yàn)閯?dòng)物與人到底不是一種生物。如,在動(dòng)物身上無效的藥物不等于臨床無效,反之亦然。因此,設(shè)計(jì)動(dòng)物疾病模型的一個(gè)重要原則是,所復(fù)制的模型應(yīng)盡可能近似于人類疾病的情況。能夠找到與人類疾病相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病當(dāng)然是比較好的。(二)重復(fù)性理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的,甚至是可以標(biāo)準(zhǔn)化的。如。
SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑(體重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定,頸正中線切口,分離肌肉和筋膜,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。3、微動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),活扣結(jié)扎近心端頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)打雙結(jié),在雙結(jié)中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),用眼科鑷輕推拴線,以頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)分叉處為參考位置。5、栓線插入預(yù)刻深度,感到有阻力,說明栓線已到達(dá)腦中動(dòng)脈(MCA),打結(jié)固定栓線。6、血管外的栓線不要留得過長,1h后拔出栓線,縫合傷口,單籠飼養(yǎng)觀察。注:前兩三天老鼠會(huì)萎靡,不進(jìn)食,注意不要,老鼠無死亡即可。脂多糖(LPS)聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。
進(jìn)而使一些生長因子受體磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后,每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗(yàn)證:幾周后,小鼠背部皮膚上出現(xiàn)色素沉著斑點(diǎn)。組織學(xué)研究表明,小鼠真皮組織中色素細(xì)胞積累,某些色素細(xì)胞表現(xiàn)出嵌套的形態(tài)學(xué)模式。缺點(diǎn):化學(xué)誘導(dǎo)黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關(guān)性。另外,此類模型可用于研究陽光對黑色素細(xì)胞痔轉(zhuǎn)化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統(tǒng)功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應(yīng)用多的模型。應(yīng)用:移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發(fā)展、轉(zhuǎn)移的一些特點(diǎn),多用于抗和轉(zhuǎn)移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細(xì)胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優(yōu)點(diǎn):同種移植模型具有免疫能力,可通過黑色素細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環(huán)境的關(guān)系。骨質(zhì)疏松癥是目前世界上發(fā)病率、死亡率和醫(yī)療保健消耗較大的疾病之一,已成為全世界范圍的嚴(yán)重的社會(huì)問題。上海動(dòng)物模型技術(shù)
可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。北京豚鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室
或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個(gè)……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以下結(jié)合實(shí)施例對本實(shí)用新型的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實(shí)施例1本實(shí)用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),包括功能設(shè)備集成底座1和設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1上的飼養(yǎng)倉2,所述飼養(yǎng)倉2具有無極調(diào)控微負(fù)壓裝置、高原低氧環(huán)境模擬裝置、高原光照環(huán)境模擬裝置15、高原溫度環(huán)境模擬裝置16、高原濕度環(huán)境模擬裝置17、動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18,所述飼養(yǎng)倉2內(nèi)設(shè)置有若干代謝籠3,飼養(yǎng)倉2前后箱體上設(shè)置有觀察窗4和若干操作窗5,飼養(yǎng)倉2左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,所述代謝籠3還包括設(shè)置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設(shè)置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實(shí)施例的工作原理:本裝置的各個(gè)功能均通過設(shè)置在飼養(yǎng)倉2上的功能控制面板19控制,本裝置外形采用304不銹鋼,具有良好的氣密性。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物送入飼養(yǎng)倉2內(nèi)部后,關(guān)閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,通過功能控制面板19實(shí)現(xiàn)飼養(yǎng)倉2內(nèi)部環(huán)境模擬。北京豚鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室